准标记电化学方法

   在准标记方法情况下,避免了对靶分子进行标记。这简化了样品制备阶段的生物芯片工艺流程(见图6.3)。HD74HC74P然而,这并不意味着,在整个分析测试过程中可以统统免去使用标记分子。 后面给出了一个具体例子[31,32]:利用嵌人剂(htercalators)的检测示意图如图6,15所示。这些嵌入剂分子在双链DNA分子的杂交化阶段被捕获,但不会绑定到单个链。这些嵌人剂可以作为标记分子的载体,以便使用之前所述的其中任何测量方法,基于电化学方式检测到双链DNA分子c此外,嵌人剂还可以携带更多的不止一个标记分子,相比只有一个标记分子,可以在单位传感器面积提供相对较高的信号。该方法的一个缺点是人类直接接触嵌人剂可能会对健康造成威胁,所以采用这种检测方式时安全要求较高。

   无标记电化学读出

    图615 在DNA探测中,嵌人剂分子混合杂交行为简图描述图6.16 带电聚合物氧化还原反应的原理图,其强度与双链DNA的数量相关联,因而可以实现完全无标记的DNA分子电化学探测[33] 图6.16给出了采用循环伏安法和图6.10所示三电极系统的技术案例示意

图,同时,完全避免了使用标记分子:在这里,氧化还原反应发生在一个覆 盖在工作电极上的带电聚合物(聚吡咯)中。杂交和相关双链的存在阻碍了反应所需氯离子的运动,从而减少了测量到的氧化还原电流。